Banca de QUALIFICAÇÃO: CAMILA APARECIDA PEREIRA DA SILVA

Uma banca de QUALIFICAÇÃO de MESTRADO foi cadastrada pelo programa.
DISCENTE : CAMILA APARECIDA PEREIRA DA SILVA
DATA : 28/03/2025
HORA: 14:00
LOCAL: Sala de Videoconferência - Faculdade de Medicina - UFCA
TÍTULO:

POTENCIAL ANTIBACTERIANO DO ÁCIDO BETULÍNICO: ESTUDO IN SILICO E IN VITRO DA INIBIÇÃO DAS BOMBAS DE EFLUXO NorA E MepA

PALAVRAS-CHAVES:

Ácido Betulínico, Bombas de efluxo, Resistência.

PÁGINAS: 92
RESUMO:

O tratamento para diversas doenças infecciosas está seriamente ameaçado pelo rápido desenvolvimento de mecanismos de resistência bacteriana. A adaptação e evolução dos microrganismos se move de forma bem mais rápida que o desenvolvimento de novas substâncias antibióticas, o que torna o tratamento de doenças infecciosas cada vez mais ineficaz e oneroso para o sistema público de saúde. Para mitigar esse problema, novas estratégia são urgentes, incluindo a descoberta de substâncias que subsidiam a produção de novos medicamentos e/ou a busca por compostos adjuvantes da terapia convencional, como o caso dos inibidores de bombas de efluxo. O ácido betulinico é um triterpeno pentacíclico do tipo lupano, que apresenta uma gama de atividades biológicas como ação antitumoral, anti-inflamatória, antiviral, antimalárica, antifúngica e antibacteriana. Nesse contexto, este trabalho tem como objetivo avaliar “in vitro” e “in silico” o potencial antibacteriano e o de reversão da resistência do ácido betulínico (AB) por meio da inibição de bombas de efluxo. As concentrações inibitórias mínimas (CIM) foram determinadas pelo método de microdiluição em caldo. Posteriormente, seus efeitos na resistência antibiótica mediada pela bomba de efluxo foram avaliados pela redução da CIM dos antibióticos norfloxacino, ciprofloxacino e do brometo de etídio (EtBr), enquanto os testes de fluorimetria e potencial de permeabilidade foram realizados pelo método de fluorescência. Experimentos de docagem molecular foram realizados para avaliar a interação com proteínas de efluxo, utilizando o AutoDock Vina. O AB não apresentou atividade antibacteriana intrínseca significativa contra as cepas de SA- 1199, SA-1199B e SA-K2068 apresentando CIM de ≥ 1024 μg/mL. No entanto, frente a MepA o composto foi capaz de reduzir a CIM do ciprofloxacino e do BrEt em 4 vezes. Nos ensaios com NorA, o AB reduziu a CIM do norfloxacino em dezesseis vezes e a CIM do BrEt em 4 vezes, indicando possíveis efeitos inibitórios para Nora e MepA. O AB induziu um aumento significativo na emissão de fluorescência das duas bombas, com aumentos de 71% e 88%, respectivamente. O teste de permeabilidade mostrou que o AB aumentou a fluorescência do sytox green, induzindo um aumento de 61% para MepA e 66% para NorA demonstrando capacidade de permeabilizar a membrana bacteriana de SA-1199B e SA- K2068. A modelagem in silico demonstrou que AB possui alta afinidade com sitio de ligação NorA, sugerindo que a inibição de bomba de efluxo pode decorrer da competição pelo sítio de ligação. A modelagem in sílico de MepA indica que a ligação do BA ao transportador ocorre com alta espessura, impedindo a ligação e a translocação de substratos, o que mantém essas substâncias no interior celular. Esse trabalho é o primeiro que avalia o potencial do AB na inibição de bombas de efluxo MepA e NorA. Em conclusão, o AB não apresentou atividade antibacteriana intrínseca significativa, no entanto, os resultados sugerem que o composto pode inibir as bombas de efluxo MepA e NorA, aumentar a emissão de fluorescência do EtBr e induzir um aumento de permeabilidade da membrana bacteriana.

MEMBROS DA BANCA:
Interno - FRANCISCO NASCIMENTO PEREIRA JUNIOR
Presidente - JACQUELINE COSMO ANDRADE PINHEIRO
Externa à Instituição - MARIA FLAVIANA BEZERRA MORAIS BRAGA - URCA