Banca de QUALIFICAÇÃO: FLAVIA EDUARDA VIDAL BARBOSA

Uma banca de QUALIFICAÇÃO de DOUTORADO foi cadastrada pelo programa.
DISCENTE : FLAVIA EDUARDA VIDAL BARBOSA
DATA : 05/12/2025
HORA: 14:00
LOCAL: Sala virtual do Google Meet
TÍTULO:

Avaliação da atividade leishmanicida in vitro da lectina de Dioclea violacea Mart ex Benth em cepas de Leishmania sp.

PALAVRAS-CHAVES:

Leishmaniose tegumentar. Dioclea violacea. Espécies reativas de oxigênio. Membrana parasitária. Permeabilidade. Potencial de membrana. Lectina.

PÁGINAS: 80
RESUMO:

As leishmanioses são caracterizadas como um conjunto de doenças negligenciadas de interesse clínico e epidemiológico. Possuem distribuição mundial e são causadas por protozoários do gênero Leishmania. O tratamento primário desta doença baseia-se no uso de antimoniais pentavalentes e drogas secundárias, como a anfotericina B. Um dos principais desafios da terapia atual encontra-se na resistência dos parasitas aos medicamentos, aos efeitos adversos por estes provocados e também no alto custo de algumas destas drogas, o que fomenta a pesquisa por novas alternativas terapêuticas. Neste contexto, encontram-se as lectinas, proteínas de origem natural capazes de desempenhar diversas funções nos organismos em que são encontradas. Desta forma, o objetivo do presente estudo foi avaliar o efeito leishmanicida da DVL frente a promastigotas de L. shawi e L. guyanensis e a atividade citotóxica desta frente a macrófagos peritoniais de camundongos BALB/C. Para isto, formas promastigotas foram incubadas com diferentes concentrações de DVL (324 – 5,06 μg/mL) e a viabilidade celular determinada por contagem em câmara de Neubauer. Por meio da determinação da CI50, foi avaliada a participação do domínio de reconhecimento a carboidratos (DRC) e a influência da manutenção da estrutura nativa da proteína na atividade da lectina. Afim de verificar possíveis mecanismos de ação envolvidos na atividade da DVL, foram realizados ensaios de fluorescência com o diacetato de 2’,7’- diclorodihidrofluoresceína (DCFH2-DA), iodeto de propídio (IP) e rodamina 123 (Rho 123), para investigação da indução da produção de espécies reativas de oxigênio (EROs), danos à integridade da membrana parasitária e alterações no potencial de membrana mitocondrial de promastigotas, respectivamente. Em função de avaliar a participação de peróxido de hidrogênio externo na atividade da lectina, foi realizado ainda o ensaio de bloqueio da atividade com a catalase (25 μg/mL). Para mais, por meio do teste do brometo de 3-(4,5-dimetiltiazol-2-il)-2,5-difeniltetrazólio (MTT), foi possível, também, determinar a citotoxicidade da DVL em macrófagos peritoniais de camundongos BALB/C. Nas avaliações realizadas, a DVL inibiu o crescimento de formas promastigotas de maneira concentração e tempo dependentes nas duas cepas, com valores de CI50/24h em L. shawi de 113,3 μg/mL e de CI50/48h em L. guyanensis de 30,27 μg/mL. Os dados obtidos mostraram que a atividade da lectina está relacionada à sua capacidade de reconhecer e se ligar a glicanos presentes nas duas espécies de leishmania e à manutenção de sua estrutura nativa. O tratamento com esta foi capaz de induzir a produção de EROs e danos à integridade da membrana celular, porém não foram observadas alterações no potencial de membrana mitocondrial dos parasitas. Além disto, a lectina demonstrou ainda toxicidade a macrófagos peritoniais de camundongos, porém em concentrações mais altas e com resultados melhores do que aqueles observados no tratamento com a anfotericina B. Os resultados obtidos sugerem que a DVL é uma alternativa promissora para o estudo das leishmanioses, entre características dos próprios parasitas até o desenvolvimento de novas alternativas terapêuticas; entretanto, mais estudos são necessários para elucidar os prováveis mecanismos envolvidos na atividade desta proteína.

MEMBROS DA BANCA:
Externa à Instituição - ANA LÚCIA ESTEVAM DOS SANTOS
Presidente - CLAUDIO GLEIDISTON LIMA DA SILVA
Externa à Instituição - DAIANY ALVES RIBEIRO
Interno - FRANCISCO NASCIMENTO PEREIRA JUNIOR
Externa à Instituição - RACQUEL OLIVEIRA DA SILVA SOUZA - F.M.NASSAU