ATIVIDADE ANTIBACTERIANA E INIBIÇÃO DAS BOMBAS DE EFLUXO NorA E MepA POR LECTINAS DE
Canavalia spp. e Dioclea rostrata BENTH EM BACTÉRIAS MULTIRRESISTENTES
bombas de efluxo; resistência bacteriana; S. aureus; E. coli.
Lectinas são proteínas ubíquas na natureza. Possuem a capacidade de reconhecer e se ligar a carboidratos simples e complexos devido a um ou mais domínios de reconhecimento a carboidrato. Devido a tais propriedades, se ligam a inúmeros carboidratos presentes em superfícies celulares e desencadeiam respostas celulares. Podendo atuar como moléculas antibacterianas. A resistência bacteriana é um problema de saúde pública a nível mundial, muitos medicamentos se tornaram obsoletos devido à resistência bacteriana, assim avaliar os efeitos bacteriostáticos, bactericidas e na combinação com antibióticos, pode ser uma alternativa para tentar conter o avanço de superbactérias. Nesse sentido, o objetivo desse trabalho foi isolar lectinas de sementes de Canavalia oxyphylla (CoxyL) Canavalia maritima (ConM) e Dioclea rostrata (DRL) e testar o seu potencial antibacteriano frente às bactérias padrões e multirresistentes de Staphylococcus aureus e Escherichia coli. As lectinas CoxyL, DRL e ConM foram purificadas por cromatografia de afinidade em coluna Sephadex G-50. Foi realizada a atividade hemaglutinante utilizando eritrócitos de coelho a 3%, inibição da atividade hemaglutinante utilizando glicose 0.1 M e desnaturação proteica por aquecimento. Os testes microbiológicos foram realizados verificando o potencial antibacteriano de CoxyL em cepas padrões e multirresistentes de S. aureus e E. coli de forma a verificar a Concentração Inibitória Mínima capaz de inibir o crescimento bacteriano como também o teste de modulação com antibiótico, e análise da ConM e DRL e seu potencial de inibição das bombas de efluxo NorA e MepA expressas em S. aureus. Foram realizados os testes de CIM e modulação com antibióticos com a CoxyL e os testes de inibição de bombas para as lectinas ConM e DRL. Os resultados demonstram que a CoxyL apresentou CIM igual ou superior a 1024 μg/mL para cepas padrões e multirresistentes das bactérias testadas, não sendo clinicamente relevantes. Nos testes de análise combinada é possível verificar efeito positivo da CoxyL em combinação com o antibiótico ampicilina com a diminuição da CIM do antibiótico de 50% em S. aureus multirresistente. Também houve diminuição significativa da CIM do antibiótico gentamicina em E. coli quando combinado com a CoxyL. Os testes de inibição de bombas com a ConM para cepa K2068 demonstraram diminuição significativa da CIM em combinação com o antibiótico ciprofloxacino de 32 µg/mL para 25 µg/mL, resultados com o brometo também mostrou diminuição da CIM de 65 µg/mL para 40 µg/mL. Nos testes com DRL em combinação com o antibiótico ciprofloxacino para cepa K2068 foi possível verificar uma diminuição significativa da CIM de 32 µg/mL para 16 µg/mL, no entanto, os resultados não foram significativos para o teste de inibição da atividade da bomba. Os demais testes utilizando a cepa 1199B não apresentaram atividade significativa na diminuição da CIM do antibiótico e do brometo de etídeo. Os resultados obtidos sugerem que lectinas analisadas apresentam potencial antibacteriano nas cepas testadas, mas de forma indireta, atuando na modificação da concentração dos fármacos e potencializando seus efeitos.